摘要:目的评价用对照提取物定性和一测多评定量相结合的方法对白芷药材进行质量控制。方法用高效液相色谱法，色谱柱:ACEUltraCoreC18(50mm×2.1mm，2.5μm)，流动相:乙腈－水梯度洗脱，流速:0.5mLmin－1，柱温:30℃，检测波长:310nm，进样量:5μL。考察该方法的专属性、标准曲线和定量下限、精密度与回收率、稳定性以及重现性。结果高效液相色谱法对白芷中的5种主要香豆素类成分，佛手柑内酯、氧化前胡素、欧前胡素、cinidilin和异欧前胡素进行了快速分离，线性关系良好(r≥0.9994)，回收率较高，均在96.4%～100.0%内。对照提取物能快速对白芷中的5种主要成分进行定性。单标定量方法测得成分含量与标准曲线法定量的结果一致。结论对照提取物定性和单标定量相结合的质量控制方法是简单、可行的，能有效地对白芷药材进行质量控制。
关键词:白芷;质量控制;对照提取物;单标定量
白芷为伞形科植物白芷或杭白芷的干燥根，其主要活性成分为香豆素类化合物［1］。白芷作为中国传统中药，在河北省均有广泛种植与分布，为河北省道地中药材。然而由于不同的加工工艺以及不同的来源，市售的白芷质量存在一定的差异，为了保证用药的安全有效，本研究将对照提取物鉴定和一测多评定量方法有机结合，建立中药质控的方法，并将其应用于河北道地药材白芷的质量控制研究，为中药对照品缺乏下的中药质量控制提供现实可行的方案。
材料和方法
1仪器与试药
佛手柑内酯对照品，规格:每瓶20mg，批号:07111221，上海同田生物技术有限公司提供;欧前胡素、异欧前胡素、cinidilin和氧化前胡素，河北医科大学药学院自制，经HPLC－DAD分析纯度不少于98%;白芷样品1～6(自然晾干的切片)，采自河北安国;白芷样品7～10(硫熏样品)，购自河北石家庄当地药店。标准白芷香豆素提取物由白芷总提取物经大孔树脂分离和硅胶柱分离所得。包含了主要的`5种香豆素成分:佛手柑内酯、氧化前胡素、欧前胡素、cinidilin和异欧前胡素，其色谱峰面积比例为0.2∶1.9∶1.0∶0.7∶0.8，与其在原药材中的比例相似。1200高效液相色谱仪，美国Agilent公司产品。
2色谱条件
色谱柱:ACEUltraCoreC18(50mm×2.1mm，2.5μm);流速:0.5mLmin－1;柱温:30℃;检测波长:310nm;流动相:乙腈－水梯度洗脱;进样量:5μL。梯度洗脱程序为0～5min，45%～45%乙腈;5～15min，45%～80%乙腈。
3溶液的制备
对照品溶液制备分别称取佛手柑内酯、氧化前胡素、欧前胡素、cinidilin和异欧前胡素对照品适量，用75%甲醇溶解、稀释配制成质量浓度为1.0mgmL－1对照品溶液。供试品溶液制备白芷药材粉碎，过3号筛，称取0.5g，置于50mL量瓶中，加入75%甲醇20mL，摇匀，称定质量，超声提取30min，取出，放冷，用75%甲醇补足质量，摇匀，取上清液过0.45μm微孔滤膜，即得。
4方法学考察
专属性分别吸取对照品溶液和供试品溶液5μL，用上述色谱条件进行分析，考察待测组分与样品中其他物质的分离情况。标准曲线与定量下限吸取对照品储备液适量，稀释成系列浓度，进样并测定峰面积，以对照品溶液的浓度为纵坐标，相应峰面积为横坐标，绘制标准曲线，进行线性回归。各分析化合物根据各自标准曲线进行定量(Method1)。将合适量的对照提取物溶解于75%甲醇中，配制成系列浓度的溶液，按上述方法对其中的主要成分欧前胡素进行线性回归，用得到的标准曲线对5种香豆素类成分进行定量计算(Method2)。将混合对照品溶液逐步稀释并进行测定，以信噪比S/N≥3时确定为检测限，以信噪比S/N≥10时确定为定量限。精密度与回收率配制低、中、高3种不同的浓度，日内精密度是在同一天内对同一份样品连续测定6次，日间精密度则是在连续3d内对同一份样品进行测定，通过计算相对标准偏差来实现。取含量已知的白芷样品0.25g，分别加入一定浓度的对照品溶液，按“供试品溶液制备”项下方法制备供试品溶液，重复进样，测定样品溶液中有效成分的含量并计算平均回收率。稳定性取白芷药材粉碎，按“供试品溶液制备”项下方法制备供试品溶液，分别于0，4，8，12，24h取供试品溶液进样测定峰面积。同时考察对照提取物溶液放置24h的稳定性。
结果
1方法学评价
专属性在上述色谱条件下，待测成分各色谱峰与其他成分分离良好，其他成分不干扰待测成分的测定。典型色谱图见图1。标准曲线与定量下限5种成分的线性关系方程和线性范围见表1，相关系数r≥0.9994，表明在线性范围内，线性关系良好。精密度与回收率5个分析物的日内、日间变异分别小于1.3%和2.3%，回收率均大于96.4%，重复性良好(ＲSD≤1.3%)。结果见表2。稳定性样品及对照提取物在室温下放置24h是稳定的。结果见表2。
2方法学应用
按“供试品溶液制备”方法制备10个批次白芷供品溶液，按色谱条件进样分析，测定5个成分的峰面积值。通过标准曲线法和单标定量法对白芷样品中的5种测定成分含量进行了计算，结果见表3。为了评价单标定量的可行性(以欧前胡素为内参，对其余4种成分进行定量估算)，用不同百分数(PD)和向量余弦相似度［Cos()］对两种方法得计算结果进行了评估。PD%=100×|X－Y|X+Y2，Cos()=∑ni=1XiYi∑ni(Xi)2∑ni(Yi)槡2其中，X，Y分别代表由标准曲线法和单标定量法计算所得成分含量，n代表样品个数。可知，5种成分的平均PD均小于5%，两种方法计算所得浓度具有一定的一致性。所有测定向量得Cos()＞0.9999，表明两种方法具有较高的相似度。
讨论
药典规定白芷含量测定的质量控制成分为欧前胡素，且该成分在白芷中含量较高，对照品易得，故选择欧前胡素为内参物。本实验结果表明，用单标定量法所测得白芷中5种香豆素类成分含量与标准曲线法所测得的含量无明显差异，说明在缺少对照品的情况下可以通过测定白芷中一种香豆素的含量来计算其他4种同类成分含量，进而更全面地评价药材质量，实现一测多评。样品测定结果表明，河北道地白芷药材中氧化前胡素含量最高，5种主要香豆素类活性成分含量基本符合氧化前胡素﹥欧前胡素﹥异欧前胡素﹥cinidilin﹥佛手柑内酯的顺序。熏硫后(样品7－10)多种香豆素类成分的含量有较大损失，此前也有文献报道此类现象［2－3］，可见熏硫是白芷样中香豆素类成分含量下降的主要因素。中药成分复杂，多成分、多指标的质量控制模式得到越来越多的认可和应用。然而，多指标定量的中药质量控制模式需要足够量的具有足够高纯度的对照品，这已成为制约中药质量控制的一个瓶颈。《中国药典》2010年版提出一测多评的分析方法［4－5］，该方法实现了中药多成分定量，解决了中药化学对照品匮乏的瓶颈问题。然而，一测多评在实际应用于定量测定时，由于只有内参物用到了对照品，其他待测成分无对照品，无法准确地确定待测组分峰(即目标峰)的位置。针对此问题，《中国药典》2005年版引入了对照提取物，将其作为标准物质收载。对照提取物不但具有相对固定的定的化学组成，含有定量指标的主要效应成分，与原药材量化关系明确，专属性强，而且具有安全、稳定的理化特性，尤其适用于中药的鉴别。对照提取物鉴定和一测多评定量相结合将有助于更加有效地对药材质量进行控制。
参考文献:
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性格的自我介绍 篇1
本人曾在校社团联合会网络信息部和检验学院学生会工作，并担任班干部；在校期间，组织策划了“广东医学院首届电子贺卡设计大赛”和“广东医学院首届电子竞技大赛”;加入了检验学院科研小组，成功申请并参与了“高效液相色谱仪检测儿童食品中的色素含量”.这些经历培养了我良好的领导、管理、协作、交际沟通和创新能力，使我能客观理智地面对问题，顾全大局，对凡事持寻求解决的态度。
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我性格开朗、积极上进；具有良好的团队精神和人际关系，对待工作认真负责、勤恳耐劳，耐心细心，在工作中善于到激励他人的作用，同时善于并热爱与人沟通交流；敢于开拓创新，有着强烈的事业心与责任感，对人生和事业充满热情和憧憬。
性格的自我介绍 篇2
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性格的自我介绍 篇3
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模拟移动床色谱(SMB)和制备液相色谱
德国KNAUER公司生产和销售高效液相色谱仪、模拟移动床色谱(SMB)、蒸汽压力渗透仪(VPO)等产品已有近40年的历史，在这40年的历程中，始终致力于提供高质量的产品和服务。在与XX创新通恒科技有限公司合作的6年时间里，两家公司由一般代理关系，发展到战略伙伴的紧密合作关系。
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一、 时间、地点:
20XX年6月28日 9:30 – 12:00
XX市浦东区龙阳路2345号XX新国际博览中心 地点:W2-M3(独立会议室)
二、 演讲者和论题:
德国KNAUER公司:Dr Biger Hoiz (生物工程学博士，分离纯化专家)
XX创新通恒公司: (总工程师)
论题:1、模拟移动床色谱技术的原理及应用
2、制备液相色谱在多肽领域的应用
XX创新通恒科技有限公司欢迎您届时光临!
德国KNAUER公司中国地区独家代理
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